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84农业网 时间:2018-03-15 作者:佚名 来源:网络整理
兔肠很长,其长度为体长的10倍左右,在医药工业上,可用兔肠作为提取肝素的原料。
1.原料要求
肝素广泛分布于动物肠粘膜、肺、肝、血液中,在体内以蛋白质复合物的形式存在,取健康兔的新鲜肠粘膜为提取原料。
2.提取方法
肝素提取方法,一般采用盐解―>离子交换工艺或酶解―>离子交换工艺,包括肝素蛋白质复合物的提取、分解和分离等三步,现以盐解―>离子交换工艺为例,介绍提取工艺流程:
(1)提取
取新鲜肠粘膜投入反应锅内,按原料重3%加入氯化钠,用氢氧化钠调节氢离子浓度至1纳摩/升(pH9),逐步升温至50~55℃,保温2小时,继续升温至95℃,持温10分钟,随即冷却。
(2)吸附
将上述提取液用30目双层纱布过滤,待冷却至50℃以下即加入714型强碱性CI-型树酯,树酯用量为提取液的2%,搅拌8小时后静置过夜。
(3)洗涤
虹吸除去上层液,收集树酯,用水冲洗至澄清、滤干。用2倍量1.4摩尔的氯化钠搅拌2小时,滤干。树酯再用1倍量1.4摩尔的氯化钠搅拌,滤干。
(4)洗脱
树酯再用2倍量3摩尔的氯化钠搅拌、洗脱8小时,滤干;再用1倍量3摩尔的氯化钠搅拌、洗脱2小时,滤干。
(5)沉淀
合并滤液,加入等量95%的乙醇,沉淀过夜,虹吸除去上清液,收集沉淀物,用丙酮脱水干燥,即得粗品。
(6)精制
将粗品溶于15倍量的1%氯化钠中,加6摩尔盐酸调节氢离子浓度至31.63毫摩/升(pH1.5),过滤至清。随即用5摩尔氢氧化钠调节氢离子浓度至0.01纳摩/升(pH11),按3%加入30%过氧化氢,25℃放置,24小时后再按1%加入过氧化氢,调节氢离子浓度至0.01纳摩/升(pH11),静置48小时,过滤,用6摩尔盐酸调节氢离子浓度至316.3纳摩/升(pH6.5),加入等量的95%乙醇沉淀。24小时后虹吸除去上清液,用丙酮脱水干燥,即得肝素钠精品。
3.成品性质与规格
肝素为白色粉末,易溶于水,不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。常用制品为注射剂。为延缓作用,提高效果,目前生产长效肝素注射液;一般封装于粉末安瓿中,临用前以注射用水溶解后供肌肉注射。
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