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84农业网 时间:2018-03-15 作者:佚名 来源:网络整理
三、传染病诊断
家兔传染病是兔病中最重要而给养兔业带来损失最大的疫病,必须尽可能早期诊断,为预防治疗提供依据,在非疫区作好预防为主的工作,在疫区做到“早、快、严、小”尽可能减少家兔死亡,降低损失,达到消灭传染病的目的。
为了正确诊断,必须采取各种检查疫病的方法,如流行病学、临床、微生物学及免疫学等诊断方法,也可根据传染病不同特点,采用上述某些方法或综合应用各种方法。
流行病学诊断:通过访问、调查,搜集有关资料进行分析研究,帮助传染病的确诊,可从以下几方面进行:
1?发病家兔地区有哪些传染病,最早发病时间、地点、季节,传播速度及蔓延情况,发病兔年龄、性别,品种及其感染率、发病率和死亡率。
2?应从家兔饲养管理,饲料配方调制方法及卫生条件及临近地区无有疫情发生。
3?传染病发生经过、发病前预防注射过哪些疫(菌)苗以及发病后治疗情况。
临床症状,剖解所见的病理变化及经过治疗的效果。
发病区域的地形、气候、昆虫及野生动物等与疫病发生的关系。
临床诊断:是诊断疫病的最基本方法,通过对疫病发生的了解,实地观察及对病、死兔剖检和测温等方法进行一般检查,另外要对疫病进行类症鉴别及疗效验证均十分重要。
病理解剖学诊断:每一种传染病均会有其特殊病痕,很多疾病通过尸体剖解可以了解体内各种器官的病理形态学的变化,如兔病毒性出血症(兔瘟)有肺出血等变化,巴氏杆菌病也有肺出血,所以要进行区别诊断。
微生物学诊断:这是查清病原体的重要手段。
1?细菌性疾病采取有病变的内脏器官,如心脏、肝、脾、肾、空肠、回肠、淋巴结等作为被检病料。
染色与镜检:取清洁玻片作被检病料的触片或涂片,自然干燥后,火焰固定,用革兰氏、美蓝或姬姆萨染液染色,待干后镜检。由于不同致病菌染色结果不一样,如A型魏氏梭菌呈革兰氏阳性大杆菌,较少能看到芽胞;巴氏杆菌呈革兰氏阴性菌,大小一致的卵圆形小杆菌。
分离培养:用不同的培养基如绵羊鲜血琼脂、血清琼脂等培养基,于37℃温箱培养20-24小时,再取其典型菌落接种马丁肉汤培养基,培养20-24小时,再作涂片检查及测生化反应,动物接种和血清学检验等。
动物接种:可以取被子检兔的脏器磨细用灭菌生理盐水作1:5或1:10稀释,也可以用分离培养菌落接种的马丁肉汤作为接种材料。一般以皮下、肌肉、腹腔、静脉或滴鼻接种家兔或小白鼠,剂量:兔0.5毫升为宜,小白鼠0.2毫升即可。若接种后兔或小白鼠发病或死亡,有典型的病理变化即可确诊。
血清学检验:其目的在于应用血清学方法对兔群进行普查诊断。方法有试管法和玻片法。试管法:将待检血清作成不同稀释度,分别加入等量诊断抗原,摇匀后放置于37℃温箱或室温2-3小时观察,凝集价在1:40以上者为阳性反应。玻片法:取被硷血清0.1毫升加于玻片上,同时加入等量诊断抗原,于15-20℃下摇动玻片使抗原与被检血清均匀混合,1-3分钟内观察絮状物,液体透明者为阳性。
2?病毒性疾病由于各种病毒在不同组织中含毒量不同,所以必须要采取含病毒量最多的组织,并要求新鲜,如兔病毒性出血症含毒量最多者是肝组织,水疱性口炎应采水疱液、水疱皮为被检材料。
病毒的分离培养:用被检材料接种于新鲜琼脂培养基或血清血红素培养基,结果均为阴性者则将被检材料磨细或将液体材料用无菌生理盐水(PH7.2左右)、磷酸盐缓冲液作1:10稀释用6号玻璃滤器过滤的滤液即可作为接种材料,同时在接种液中加入青、链霉素(每毫升1000单位)。
接种:根据接种材料可以分为下面三种方式:
鸡胚接种:取9-10日龄的鸡胚,每胚绒尿腔接种0.2毫升,一般在接种后48-72小时内死亡。
组织细胞接种:用各种动物组织的原代细胞或传代细胞接种,病毒能在细胞上繁殖,同时能使细胞产生病变。
动物接种:通常用小白鼠、豚鼠和家兔接种病料。有的接种家兔一般皮下、肌肉或腹腔注射0.5毫升,有的用豚鼠皮内接种,如水疱性口炎。
(3)病毒的鉴定:分离得到的病毒材料要以电子显微镜检查、血清学试验即可确认,进一步还需做理化和生物学特性鉴定。
(4)血清中和试验:在被检病料上清液中加入等量该病标准高免血清,混匀后于37℃温箱作用30分钟;对照组用生理盐水代替血清。两组材料分别接种易感动物,一般观察7天。如果血清组获保护,而对照组发病死亡即可确诊。
(5)兔疫学诊断:是一种重要的诊断技术,这些方法具有灵敏、快速、简易、准确的特点,用于传染病的诊断,大大地提高了诊断水平,至今应用已十分广泛。
在动物传染病的免疫学检验中,除凝集反应、沉淀反应、补体结合反应;中和反应等血清学检验方法外,先后又研究出兔疫扩散、变态反应、萤光抗体技术、酶标记技术、单克隆抗体技术等属于免疫学诊断的范畴。
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