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84农业网 时间:2018-03-14 作者:佚名 来源:网络整理
1.取材选择需要进行脱毒的甘薯品种,大田收获后彻底清洗消毒,排种在干净的消毒过的细沙、沙加土或蛭石中,保持28~32℃左右。经常浸润,促其发芽,当薯块幼苗长至10~15厘米(2~3周时间)时可切取顶端做茎尖组织培养。
2.消毒切取茎尖2~3厘米长,先用0.1%的洗衣粉搅洗5~10min,然后用自来水冲洗30min。随后在超净工作台上用70%的酒精浸泡半分钟,再用5%的次氯酸钠溶液消毒10min,无菌蒸馏水清洗3次。
3.切取茎尖在无菌操作条件下,将消毒的茎尖置于体视解剖镜下,用解剖刀削去小叶片,切取附带1~2个叶原基的茎尖,长约0.2~0.4毫米。
4.接种将长约0.2~0.4毫米的茎尖用经酒精灯火焰消毒的枪状镊接种到培养试管中,管内装有0.7%琼脂固化,附加适量激素的MS培养基,然后用铝泊纸盖上管口,置入温度28~30℃、光强3000~4000lx、光照16h的培养室内培养试管苗。
5.转管7~14天,待茎尖分生组织转绿并分化出芽后,转移到不加激素的1/2MS培养基上生长,培养条件为温度26~28℃、光强1000~16001x、光照14h,经2~3个月后茎尖分生组织将长成具有2~3个叶片的完整植株。经过上述程序培育的幼苗再经过病毒检测、优良株系评选、高级脱毒苗快繁、脱毒原原种繁殖、脱毒原种繁殖、脱毒良种繁殖等几道工序生产的甘薯苗在普通地块上种植,收获的种薯为脱毒良种,为大面积脱毒用种。
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